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【实验必读】实验用鼠如何选择?
2017-06-12 14:36

  饲养繁殖实验动物的目的是用实验动物作为人类的替难者进行各种生物医学研究,如果没有实验动物,生命科学无法得到发展,新的医疗器械只能在人身上应用,新药只能在人身上观察药效和毒性反应。外科新技术也只能在病人身上进行试验。至今,我们仍然没有任何办法来完全替代实验动物,实验动物在科学实验中依然占据举足轻重的地位。

  实验动物中常见的是鼠类,为使各位科研工作者可以正确选择鼠类动物完成相应的实验,鼠根据遗传可以分为近交系和封闭群(远交系)、实变系,。

  一、近交系

  近交系是指至少连续20代的全同胞兄弟姐妹或亲子交配培育而成的动物。近交系数高达99.6%。特征是:遗传基因位点纯合性、同基因性、长期遗传稳定性,表现型一致性、独特性、可分辨性,分布广泛性、资料可查性。

  1. BALB/c 小鼠:该鼠为生物医学研究中常用的小鼠品系之一。

  来源:1913年,贝格(Bagg)从美国商人欧希尔(Ohio)处购得的白化小鼠原种,以群内方法繁殖。麦克•多威尔(MacDowell)在1923年开始作近交系培育,至1932年达26代,命名为BALB/c品系。安德尔文特(Andervont)等人使BALB/c广为传播和应用。1985年我国从美国NIH引进到中国医学科学院实验动物研究所,为BALB/c第180代。

  主要特性:①乳腺肿瘤自然发生率低,但用乳腺肿瘤病毒诱发时发病率高;卵巢、肾上腺和肺的肿瘤在该小鼠有一定的发生率。②易患慢性肺炎。③对放射线甚为敏感。④与其他近交系相比,肝、脾与体重的比值较大。20月龄的雄鼠脾脏有淀粉样变。⑤有自发高血压症,老年鼠心脏有病变,雌雄鼠均有动脉硬化。⑥对鼠伤寒沙门氏菌补体敏感,对麻疹病毒中度敏感。对利什曼原虫属、立克次氏体和百日咳组织胺易感因子敏感。

  主要用途:广泛地应用于肿瘤学、生理学、免疫学、核医学研究,以及单克隆抗体的制备等。

  2.C57BL/6小鼠:该鼠为生物医学研究中常用的小鼠品系之一。

  来源:1921年立特(Little)用艾比•拉特洛坡(AbbyLathrop)的小鼠株,雌鼠57号与雄鼠52号交配而得C57BL1937年从C57BL分离出C57BL/6和C57BL/10两个亚系。1985年从Olac引到中国医学科学院实验动物研究所。

  主要特性:①乳腺肿瘤自然发生率低,化学物质难以诱发乳腺和卵巢肿瘤。②12%有眼睛缺损;雌仔鼠16.8%,雄仔鼠3%为小眼或无眼。用可的松可诱发腭裂,其发生率达20%。③对放射物质耐受力中等;补体活性高;较易诱发免疫耐受性。④对结核杆菌敏感。对鼠痘病毒有一定抵抗力。⑤干扰素产量较高。⑥嗜酒精性高,肾上腺素类脂质浓度低。对百日咳组织胺易感因子敏感。⑦常被认作"标准"的近交系,为许多突变基因提供遗传背景。

  其主要特点为近交系小鼠,试验结果精度高,可比性好,应激反映均一。

  主要用途:是肿瘤学、生理学、免疫学、遗传学研究中常用的品系。

  3.C3H/He小鼠:C3H小鼠是Strong于1920年用Bagg白化雌鼠与DBA雄鼠杂交后经连续全同胞近交而育成。C、CBA、CH1和C121等品系亦出于本杂交组合。1930年自Strong处转到Andervont(An)处。经近交繁殖至35代时,于1941年到Heston(He)处,成为C3H/He。到1975年时,繁殖达135+代。目前C3H/He小鼠已在各地大量使用,形成了许多亚系,如C3H/HeN,C3H/HeJ等。C3H/He小鼠基因型为AABBcc。毛色为白色。其14月龄小鼠自发肝癌发病率达85﹪。自发乳腺肿瘤发病率:繁殖雌鼠平均达90﹪(318日龄雌鼠为100﹪,234日龄繁殖雌鼠为67﹪),272日龄繁殖雄鼠为84﹪。补体活性高。168日龄平均体重:雌鼠为32 g,雄鼠为34g。

  二、封闭群(远交系)

  在不从外部引入新种的条件下,以非近亲交配的方式,至少连续繁殖4代以上(小鼠要求15代,5年)的一个种群动物,可称之为封闭群动物。封闭群要求不以近交形式,也不与群外动物杂交。既保持其遗传性状的相对稳定,又避免近交衰退的出现。作为繁殖用的封闭群动物必须遗传背景明确,来源清楚,有较完整的资料(包括种群名称、来源、遗传特点及主要生物学特性)。

  1.ICR(又称swiss Hauschka)小鼠:

  来源:为美国豪斯卡(Hauschka)研究所饲养的瑞士种小鼠。后由美国肿瘤研究协会分送各地,取名为ICR。1973年由日本国立肿瘤研究所引进我国。

  主要特性:繁殖力强,适应性强,生长速度快。

  主要用途:常用于药理毒理研究和生物制品的鉴定及胚胎实验。由于该动物母性强,常用于代孕

  2.KM小鼠:即昆明小鼠,一直是我国生产量、使用量大的远交群小鼠,被广泛应用药理学、毒理学等领域的研究,以及药品、生物制品的生产与检定。1926年美国Rockfeller研究所从瑞士引入白化小鼠培育成Swiss小鼠。1944年3月17日卫生部北京生物制品研究所汤飞凡从印度Hoffkine研究所引进Swiss小鼠,饲养在中国昆明中央防疫处。由于该小鼠起初引入地是昆明,故称之为昆明小鼠,这就是昆明小鼠品系名称的由来。KM小鼠基因库大,基因杂合率高,目前国内已从KM小鼠远交群中先后培育出不少近交系小鼠。KM小鼠被毛白色,54日龄性成熟,雄鼠体重31g,平均日增重0.55g,雌鼠平均日增重0.37g。平均窝仔数7.25只。断乳存活率82.15﹪,胎间隔30.9天。肿瘤自发率较高,占淘汰鼠的22﹪,且从生产第一胎就开始出现。经50多年的选育,现在KM小鼠肿瘤自发率极低。不同地饲养的昆明小鼠封闭群的生长发育与繁殖性能存在一定差异。但其共同特点是抗病力和适应力很强,繁殖率和成活率高。

  3.NIH小鼠:NIH小鼠是由美国国立卫生研究院(NIH)培育而成。被毛白色。该小鼠的特点是繁殖力强,产仔成活率高,雄性好斗。

  4.CFW小鼠:CFW小鼠也是1973年由日本国立肿瘤研究所引入我国的。被毛白色。该小鼠起源于Webster小鼠,1935年英国Carwarth从Rockeffler研究所引进,经过20代近亲兄妹交配后,采用随机交配而成。

  5.LACA小鼠:LACA小鼠也是1973年由英国实验动物中心引入我国的。被毛白色。LACA小鼠其实是LACA小鼠引进英国实验动物中心后改名而成的。

  三、突变系(mutant strain)

  由自然突变,或经人工诱导,使动物正常染色体上的基因发生突变,动物表现出某种遗传缺陷,且这种特异的遗传性状能够维持稳定的遗传品质。这种变化了的能保持遗传基因特性的品系,称之为突变系。如侏儒、无毛、肥胖症、肌萎缩、白内障、视网膜退化等。已成为人类疾病模型的有贫血(anemia)、白内障(cataract)、侏儒(dwarf)、无毛(hair-less)、色素性视网膜炎(retinitis pigmentosa)、各种神经麻痹(paralysis)、先天性畸形(congenital malformations)、肾异常(kidney anomalies)、椎骨脱臼症(slipped disease)、上腭裂(Harelip and cleftpalate)等突变系。

  1.nude小鼠:即裸小鼠。

  1962年,英国在非近交系小鼠中偶然发现个别无毛小鼠。两年后,Flanagan证实是不同与一般无毛小鼠的突变种,取名为nude小鼠。该小鼠先天性无胸腺,其T淋巴细胞功能缺陷,是由于一个隐性突变基因所致。该基因位于第11对染色体上,常用“nu”表示裸基因符号。将裸基因“nu”导入其他品系小鼠中可获得不同的突变系。常用的裸小鼠突变系有BALB/c–nu、NC-nu、C3H-nu、Swiss-nu等。

  裸小鼠纯合子(nu/nu)的主要特征:无毛,裸体和无胸腺。新生裸小鼠已无鼻毛为特征,足尖经常收缩呈螺旋样畸形。成年雌性发情期不规则,卵巢小,用绒毛膜促性腺激素不能诱发排卵,雄性精子为不成盘卷状,新生裸小鼠3周后省长明显迟缓。罗小树纯合子全身几乎无毛,偶见背部有稀疏的带状毛,皮薄有皱褶。皮肤色素BALB\c-nu为浅红色白眼;C3H-nu为灰白色黑眼;C57BL-nu黑灰色至黑色,运动功能正常。裸小鼠胸腺仅有残迹或异常上皮,这种上皮不能使T细胞正常分化,缺乏成熟T细胞的辅助、抑制和杀伤功能。因而细胞免疫力低下,失去正常T细胞功能。但其B淋巴细胞功能基本正常。成年裸小鼠(6-8周龄)较普通鼠有较高水平的NK细胞活性,而有术(3-4周龄)的NK细胞活性低下,裸小鼠粒细胞比普通小鼠低。

  主要用途:裸小鼠的发现为肿瘤学等方面的研究提供了难得的模型材料,目前,该小鼠已成医学研究领域中不可缺少的实验动物之一。

  2.SCID小鼠

  来源:SCID(severe combined immune deficency, SCID)的英文意思是严重联合免疫缺陷,SCID小鼠即严重联合免疫缺陷小鼠。在1983年由美国的波斯玛M.J(BosmaM.J)首先从C•B-17近交系小鼠中发现,是位于第16号的染色体,又称为scid的单个隐性基因发生突变所致,SCID小鼠是C•B-17/lcrJ的同源近交系。1988年从美国Jackson实验室引进我国。

  主要特性:①SCID小鼠外观与普通小鼠无异,体重发育正常。唯胸腺、脾脏、淋巴结的重量仅为正常小鼠重量的I/3以下。②胸腺、脾脏、淋巴结中的T淋巴细胞和B淋巴细胞大大减少,细胞免疫和体液免疫功能缺陷;但巨噬细胞和NK细胞功能末受影响。③骨髓结构正常,外周血中的白细胞和淋巴细胞减少。④容易死于感染性疾病,必须饲养在屏障系统中。⑤两性均可生育,每胎产仔3~5只,寿命达1年以上。

  主要用途:广泛应用于免疫细胞分化和功能的研究,异种免疫功能重建,单克隆抗体制备,人类自身免疫性疾病和免疫缺陷性疾病的研究,病毒学和肿瘤学研究等。

  3.NOD小鼠:

  自发I型糖尿病以及多种自身免疫疾病鼠。通过病理学观察发现,NOD小鼠自身免疫性胰岛炎最早发生于4周龄。NOD小鼠发病后,充分呈现该品系小鼠糖尿病的生理生化特征即:尿频、多饮、高血糖的症状。在几周的时间内,血糖迅速升高,饮水量剧增,大量地排尿,体重迅速下降,在这个过程中,患鼠血糖呈先迅速上升,后逐步下降,但仍维持高于正常值的状态,体重直线下降,最后昏迷而死亡。

  主要用途:主要用于I型糖尿病以及免疫耐受等方面的免疫研究。

  希望本篇文章可以为请各位科研工作者在实验动物的选择上能够起到一定的贡献。

  (肝研所刘辉)

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