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长时间细胞观察及功能分析系统
肝研所 助理研究员 刘辉

  目前,大部分的细胞检测方法采用的仍然是传统的终点法——仅仅给出最终结果,而且往往需要标记细胞和破坏细胞。这种方法无法得到细胞在生长时的真正状态,也无法对细胞的生长过程做出动态的监测和分析。
    年初我院肝胆疾病研究所购置的“长时间动态细胞观察及功能分析系统”,是由美国Essen公司开发研制的,目前本市只有两台,它用一种非侵入式的方法,实时记录细胞的生长状态。
    信号采集机可放置于培养箱中,通过显微拍照,对培养细胞进行连续的监测,并可远程控制、数据读取与分析。系统可自动收集每个时间点的相差图像和红/绿荧光图像,除了可以得到各种格式的图像或动态录像外,还可以得到由系统软件自动生成的基于图像应用的各类图表,以显示细胞的变化及趋势。自由组合载体托盘型号,已有托盘可满足200多种不同规格培养瓶、培养皿、孔板、载玻片。无需特殊培养耗材,节省实验成本。
    IncuCyteZOOM根据实验不同,分为十一个方面的应用:单克隆筛选、干细胞观测、细胞增殖、细胞质控、细胞毒性、细胞凋亡、细胞迁移与侵袭、血管生成、神经生长示踪、报告基因、3D肿瘤球观测。每种应用均可定量检测,输出图片、动态影像、原始数据、变化曲线等资料。
    研究所正将其中的几项应用于实验,例如,细胞迁移与侵袭。传统划痕方法是利用枪头尖划出伤口,96个孔要反复操作96次,这样划出的伤口宽窄不一,并且容易造成细胞污染。IncuCyte的Migration模组中有96孔的伤口划痕器(Wound Maker),可以在96孔微孔板上生成96个均匀一致的伤口,然后用IncuCyte记录伤口愈合(Wound Healing)的实时动态全过程。
    另一个应用是细胞的杀伤实验(即细胞毒实验),运用NucLight试剂将活细胞染成红色荧光,当细胞死亡时,细胞膜破裂,非渗透的染料YOYO-1与DNA结合发出绿色荧光,可通过获取4×、10×或20×的高清晰度相差图像,跟踪细胞形态,确认细胞是否死亡,并可从双色分析仪中输出数据,计算EC50和IC50,计算发生细胞毒性的细胞数目及动态的荧光图像。

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